儀器名稱：紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)系統(tǒng)
儀器型號(hào)：Lambda 25
生產(chǎn)廠家：perkinElmer
使用方法：開(kāi)機(jī)步驟
1 開(kāi)光譜儀電源
2 開(kāi)計(jì)算機(jī)電源
3 在文件治理器中用鼠標(biāo)指按UV WinLab圖標(biāo)，分光光度計(jì)此時(shí)出現(xiàn)UV WinLab的應(yīng)用窗口，儀器已預(yù)備好，可選用適當(dāng)方法進(jìn)行分析操縱。
2 方法：在分析中必須對(duì)分光光度計(jì)設(shè)定一些必要的參數(shù)，這些參數(shù)的組合就形成一個(gè)“方法”。Lambda系列UV WinLab軟件預(yù)設(shè)四類常用方法。
1）掃描（SCAN）,用以進(jìn)行光譜掃描。
2）時(shí)間驅(qū)動(dòng)（TIME DRIVER）,分光光度計(jì)用以觀察一定時(shí)間內(nèi)某種特定波優(yōu)點(diǎn)縱坐標(biāo)值的變化，如酶動(dòng)力學(xué)。
3）波長(zhǎng)編程（WP）用以在多個(gè)波長(zhǎng)下測(cè)定樣品在一定時(shí)間內(nèi)的縱坐標(biāo)值變化，并可以計(jì)算這些縱坐標(biāo)值的差或比值。
4）濃度（CONC）用以建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并測(cè)定濃度。
2.1 進(jìn)進(jìn)所需方法，在方法窗口中選擇所需方法的文件名。
2.2 方法的設(shè)定
2.2.1 掃描、波長(zhǎng)編程及時(shí)間驅(qū)動(dòng)
各項(xiàng)方法可根據(jù)顯示的參數(shù)表，分光光度計(jì)逐項(xiàng)按需要選用或填進(jìn)，并可參考提示。
2.2.2 濃度
濃度方法窗口下方標(biāo)簽較多，說(shuō)明做濃度測(cè)定時(shí)需要參數(shù)較多。用鼠標(biāo)指按每一標(biāo)簽，可翻出下頁(yè)，其上有一些需要測(cè)定的參數(shù)。必須逐頁(yè)設(shè)定。
3 工具條
3.1 SETUP
當(dāng)所需的各項(xiàng)參數(shù)都已在參數(shù)中設(shè)好后，分光光度計(jì)必須用鼠標(biāo)指按SETUP，才能將儀器調(diào)整到所設(shè)狀態(tài)。
3.2 AUTOZERO
用鼠標(biāo)指按此鍵，分光光度計(jì)即進(jìn)行調(diào)零（在光譜掃描中則進(jìn)行基線校正）。
3.3 START
用鼠標(biāo)指按此鍵，分光光度計(jì)光度計(jì)即開(kāi)始運(yùn)行所設(shè)定的方法。
4 方法運(yùn)行
4.1 掃描，時(shí)間驅(qū)動(dòng)，波長(zhǎng)編程
方法選好后，先放進(jìn)參比溶液，按AUTOZERO鍵，進(jìn)行自自動(dòng)校零或背景校正結(jié)束后再放進(jìn)樣品，按START，分光光度計(jì)即開(kāi)始進(jìn)行，同時(shí)屏幕上出現(xiàn)圖形窗口，將結(jié)果顯示出來(lái)。
4.2 濃度
4.2.1制訂標(biāo)準(zhǔn)曲線
1 方法選好后，確認(rèn)各項(xiàng)數(shù)據(jù)正確，特別是REFS頁(yè)中第一行要選中右上角的“edit mode”。再放進(jìn)參比溶液，按AUTOZERO鍵自動(dòng)校零或背景校正。
2 按setup,待該圖標(biāo)消失后，再按“start”,按提示依次放進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)色列的各管溶液，每次都按提示進(jìn)行操縱。
3 分光光度計(jì)標(biāo)準(zhǔn)色列測(cè)定 完畢后，屏幕上出現(xiàn)calibgraphwindow,顯示擬合的標(biāo)準(zhǔn)線，并標(biāo)出各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)管的位置，屏幕下方還有一條Concentration mode的對(duì)話框，可以用來(lái)修改擬合的曲線類型（按 change calbration）,或修改標(biāo)準(zhǔn)溶液的任何一管（replace）,或取消某一管（delete）,或增加標(biāo)準(zhǔn)溶液管數(shù)（add）。如過(guò)已經(jīng)滿足，則按analyse sample鍵，進(jìn)進(jìn)樣品測(cè)定窗口。
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